天门冬酰胺酶厂家直销 天门冬酰胺酶添加量与适用范围

一、简介

门冬酰胺酶(asparaginase)别称天冬酰胺酶、门冬酰胺酶等,它的主要功能是水解天门冬酰胺为天门冬氨酸与氨,在动物、微生物、植物组织中广泛存在。动物体内的天门冬酰胺酶主要存在于哺乳动物和鸟类的肝、胰、肾、胃和脾中。 黑曲霉中的天门冬酰胺酶有两种状态：一种是褐色或浅黄色的液体,一种是淡或深黄色的粉末。能溶于水,但在氯仿、丙酮等有机溶剂中不溶。贮存在水溶液20℃、7天或5℃、14天酶均有活性。 黑曲霉CICC2462作为本实验的受体菌,该菌株具有的优势：高表达的蛋白能力、及强的分泌能力、较低的胞外蛋白酶活性、对筛选标记潮霉素及其的敏感。通过基因置换技术把目的基因定点整合到内源高表达的糖化酶基因(glaA)位点,该位点是转录的活跃区,基因调控简单,通过基因置换技术可以消除内源高表达糖化酶基因对外源基因的竞争效应,可实现外源基因的高效表达、工程菌的发酵条件可以进一步得到简化。构建黑曲霉表达载体pSZHG-Asp,采用农杆菌介导黑曲霉遗传转化,该方法具有转化效率高、同源重组率高、遗传稳定性好等特点。利用hph基因表达框两侧的序列,在后续实验中进一步删除潮霉素筛选标记基因,获得食品级天门冬酰胺酶工程菌。此研究思路为国内构建天门冬酰胺酶工程菌提供了新的途径,为高效安全生产酶制剂提供了新的表达系统